Гестагенная активность
тест Clauberg-McPhail («золотой стандарт»)
Основное содержание работы
Эстрогенподготовленным самкам кроликов назначают испытуемый препарат в заданном диапазоне доз, состоящем из 5-6 точек. На следующий день после последнего введения препарата, проводят эвтаназию и вскрытие животных. Фрагмент одного рога матки подвергают гистологической обработки. Оценку прогестагенной активности проводят по шкале McPhail, принимая во внимание степень прегравидных изменений эндометрия. Результаты опыта обрабатывают методом регрессионного анализа. Биологическую активность оценивают по ЕD50, соответствующей индексу McPhail, равному 2. Относительную прогестагенную активность, определяют, принимая за единицу активность прогестерона.
Вид животных и их количество
Инфантильные самки кроликов массой 600-1000г.
25-30 самок – на 5-6 доз одного препарата (на 1 дозу одного препарата – 5 самок)
Продолжительность исследования 2,5-3 месяца.
Стоимость исследования от 450 тыс. руб.
тест Corner-Allen (на сохранение беременности)
Основное содержание работы
Самок спаривают в состоянии «охоты». Через 18 часов после покрытия проводят двустороннюю овариэктомию. Определяют количество лопнувших фолликулов. В течение последующих 6 дней назначают испытуемый гестаген. На 7-ой день проводят вскрытие. В извлеченной матке подсчитывают количество и оценивают качество сохраненных бластоцист. Соотношение бластоцист к числу проовулировавших фолликулов является показателем степени сохранения беременности
Вид животных и их количество
Половозрелые самки кроликов массой 2500-3000г.
5-6 самок – на 1 дозу одного препарата
Продолжительность исследования 2-2,5 месяца.
Стоимость исследования от 210 тыс. руб.
Антигестагенная активность
Эксперимент проводят по схеме, описанной выше, с некоторыми дополнениями. Одновременно с введением испытуемого препарата каждое животное в подопытных группах получает инъекции прогестерона.
Продолжительность и ориентировочная стоимость те же
Эстрогенная активность
Метод Dorfman (утеротропный тест)
Основное содержание работы
1 этап – рандомизированным подопытным животным в течение 3-х дней вводят подкожно эстрадиол и испытуемое соединение. Животные контрольной группы получают в адекватном объеме растворитель. На 4-й день животных подвергают эвтаназии, вскрывают, иссекают и взвешивают матку. Регистрируют массу тела в начале и конце опыта. Утеротропную активность оценивают по увеличению массы матки, пересчитанной на 100г массы тела животного в сравнении с контрольной группой.
2 этап – Для подтверждения эстрогенного ответа проводят гистологическое исследование фрагмента рога матки экспериментальных и контрольных животных. Об эстрогенной активности судят по линейным показателям диаметра рога матки и толщины эндометрия. Проводят межгрупповое сравнение.
Вид животных и их количество
Инфантильные крысы-самки линии Вистар. 30 шт. (3 группы по 10 животных)
Продолжительность исследования 2-2,5 месяца.
Стоимость исследования 1 этап - от 180 т. руб., 2 этап – от 240 т. руб
Вагинотропный тест
Основное содержание работы
Исследование проводят на половозрелых овариэктомированных крысах линии Вистар. Испытуемый препарат и эстрадиол назначают животным с одновременным мониторингом цитологической картины влагалищных мазков. Выявление у животных стадии проэструс-эструс указывает на наличие эстрогенной активности
Вид животных и их количество
Половозрелые самки-крыс линии Вистар, 20 шт. (2 группы по 10 животных)
Продолжительность исследования 2-3 месяца.
Стоимость исследования от 330 тыс. руб.
Антиэстрогенная активность
Эксперимент проводят по схеме, описанной для эстрогенной активности, за исключением того, что каждое животное в подопытных группах получает кроме испытуемого соединения стандартную стимулирующую дозу эстрадиола. Испытуемое соединение и эстрадиол вводят отдельно в разных инъекциях, чтобы свести к минимуму возможные взаимовлияния веществ.
Анти-эстрогенную активность оценивают по уменьшению утеротропного ответа в подопытных группах по сравнению с группой получающей эстрадиол.
Продолжительность и стоимость те же.
Контрацептивная активность
14-тидневный циклический тест
Основное содержание работы
Животным подопытной группы с установленным эстральным циклом назначают испытуемый препарат в заданной дозе. Контрольная группа получает растворитель. На третий день введения препарата самок покрывают. День обнаружения сперматозоидов в мазке считают первым днем беременности. Покрытых самок отсаживают, завершая 14-тидневный курс введения вещества. На протяжении всего эксперимента проводят контроль влагалищных мазков. На 20-й день беременности животных вскрывают, определяют число желтых тел, мест имплантации, плацентации, количество плодов. Высчитывают контрацептивную активность, пред- и постимплантационную эмбриональную гибель
Вид животных и их количество
Половозрелые самки-крыс линии Вистар 20 шт. (2 группы по 10 животных)
Продолжительность исследования 2-2,5 месяца.
Стоимость исследования от 340 тыс. руб
тест post coitus
Основное содержание работы
Эксперимент проводят по аналогии с описанным выше. За исключением иного режима введения препарата, который назначают самкам в день покрытия и продолжают в течение 3-х дней (посткоитально)
Вид животных и их количество
Половозрелые самки-крыс линии Вистар 20 шт. (2 группы по 10 животных)
Продолжительность исследования 2-2,5 месяца.
Стоимость исследования от 340 тыс. руб.
Андрогенная и анаболическая активность
тест Hershberger
Основное содержание работы
Гонадэктомированным рандомизированным по группам животным в течение 7 дней, начиная со дня кастрации, ежедневно назначают исследуемый препарат и тестостерон. На 8 день проводят эвтаназию и вскрытие животных. Извлекают и измеряют массу семенных пузырьков, вентральной простаты и m. levator ani. Об андрогенной активности препарата судят по увеличению массы семенных пузырьков и вентральной простаты, об анаболической – по m. levator ani по сравнению с животными контрольной группы, не получающими гормональную стимуляцию
Вид животных и их количество
Инфантильные крысы-самцы линии Вистар. 30 шт. (3 группы по 10 животных)
Продолжительность исследования 1,5-2 месяца.
Стоимость исследования от 360 тыс. руб
Антиандрогенная активность
Эксперимент проводят по схеме, описанной для андрогенной активности, за исключением того, что каждое животное в подопытных группах получает кроме испытуемого соединения стандартную стимулирующую дозу тестостерона.
Продолжительность и стоимость те же.
Глюко- и антикортикоидная активность
тимолитический тест
Основное содержание работы
Подопытных и контрольных животных рандомизируют по группам. Испытуемое соединение и гидрокортизона ацетат вводят в течение 4-х дней. Животные контрольной группы получают в адекватном объеме растворитель. На 5-й день животных подвергают эвтаназии, вскрывают, иссекают и взвешивают тимус. Глюкокортикоидную активность оценивают по влиянию тестируемого вещества на массу тимуса, пересчитанной на 100г массы тела животного в сравнении с контрольной группой. Антиглюкокортикоидную активность оценивают при комбинированном введении тестируемого вещества и гидрокортизона ацетата
Вид животных и их количество
Инфантильные крысы-самки линии Вистар. 30 шт. (3 группы по 10 животных)
Продолжительность исследования 1,5-2 месяца.
Стоимость исследования от 180 тыс. руб
Антиовуляторная активность
тест с индукцией овуляции
Основное содержание работы
Изучают влияние вещества на овуляцию, индуцированную в/в введением ацетата меди. 1 группа получает препарат в разовой дозе с одновременным введением ацетата меди. 2 группа получает препарат в течение 5 дней. Последнее введение препарата проводят одновременно с индукцией овуляции. 3 группа – контрольная, получает однократно растворитель в адекватном объеме и раствор ацетата меди. Через сутки после индукции овуляции подсчитывают число проовулировавших фолликулов. Проводят межгрупповое сравнение результатов
Вид животных и их количество
Половозрелые кролики-самки. 18 шт. (3 группы по 6 животных)
Продолжительность исследования 1,5-2 месяца.
Стоимость исследования от 270 тыс. руб
Гонадотропная активность
Биологический количественный тест
Основное содержание работы
Активность препарата определяют по увеличению массы добавочных половых желез у неполовозрелых крыс-самцов или по увеличению массы матки у неполовозрелых крыс-самок. Тестирование проводят в трех дозах в сравнении с действующим Международным стандартом. Группа контроля получает инъекции раствора хлорида натрия
Вид животных и их количество
Неполовозрелых крысы-самки или самцы. 70-80 шт. (7 группы по 8-10 животных)
Продолжительность исследования 2,5-3 месяца.
Стоимость исследования от 400 тыс. руб
Токолитическая активность
Основное содержание работы
Беременным наркотизированным крысам подшивают электроды в область рога матки для регистрации биопотенциалов миометрия до введения испытуемого вещества (норма) и после в течении 1 часа с интервалом в 10 минут. О моторной деятельности матки судят по величине амплитуды и частоты биопотенциалов миометрия
Вид животных и их количество
Половозрелые самки-крыс. 16 шт. (2 группы по 8 животных)
Продолжительность исследования 1,5-2 месяца.
Стоимость исследования от 320 тыс. руб
Соматотропная активность
Tidia-тест (на модели гипофизэктомированных 26-28 дневных самок крыс)
Основное содержание работы
Формируют 2 группы гипофизэктомированных инфантильных самок крыс. Первая получает испытуемый препарат в установленной дозе, вторая – стандартный препарат сравнения. Через сутки после последней инъекции, проводят вскрытие животных, осмотр области турецкого седла на отсутствие гипофиза. По толщине проксимального эпифизарного хряща большой берцовой кости окрашенной нитратом серебра судят об активности тестируемого препарата в сравнении со стандартом
Вид животных и их количество
Инфантильные гипофизэктомированные самки-крыс. 20 шт. (2 группы по 10 животных)
Продолжительность исследования 1,5-2 месяца.
Стоимость исследования от 800 тыс. руб